产品货号：
KD0757
中文名称：
WAT11感受态细胞
英文名称：
WAT11 Chemically Competent Cell
产品规格：
10×100μL|100×100μL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
保存：-80℃
产品储存：-80℃保存，6个月有效。
产品组成：
基因型：
MATa leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1his3-11,15。
使用方法：
1.取WAT11感受态细胞100μL于冰上融化，依次加入预冷的目的质粒2～5μg，Carrier DNA(95～100℃，5min，快速冰浴，重复一次)10μL，PEG/LiAc 500μL并吹打几次混匀，30℃水浴30min (15min时翻转6～8次混匀)。
2.将离心管置于42℃水浴15min(7.5min时翻转6～8次混匀)。
3.5000rpm离心40 s弃上清，ddH2O 400μL重悬，离心30s弃上清。
4.ddH2O 50μL重悬，涂板，29℃培养48-96h。
5.筛选培养基可选本公司SD系列产品，产品链接(http://www.Biorab.com/Column_Content.asp?Column_ID=48766)
注意事项：
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3.同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
4.酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae WAT11菌株对高温敏感，最适生长温度为27～30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
5.菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的Adenine被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破坏，Adenine合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P-ribosylamino imidazole (AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
6.酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。
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